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    ELISA試劑盒實驗前樣本的處理方法

    發布時間: 2020-05-14  點擊次數: 117次
      ELISA試劑盒得到全世界科研工作者的認可及推崇,在歐美及中國獲得很大的推廣,尤其是國內生化領域的長足發展。在采集樣品之前必須有一個完整的計劃,清楚要測試的成分是否足夠穩定。同一回采集的ELISA樣本被及時存放在4℃。對於第二天測試的樣本,樣品應在加載後的-20℃及時冷凍。如果有條件,將它們冷凍到-70℃。標本應避免反複凍融。液體標本:包括血清、血漿、尿液、胸水和腹水、腦脊液、細胞培養上清液等。
     
      1、血清
     
      室溫自然凝固10-20分鍾後,將血液離心約20分鍾(2000-3000轉/分)。仔細收集清洗。如果保存過程中出現沉澱,應再次離心。
     
      2、等離子體
     
      應根據樣品的要求選用EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑。混合10-20分鍾後,離心約20分鍾(2000-3000轉/分),仔細收集,保存過程中如有沉澱形成,應再次離心。
     
      3、尿液
     
      用無菌管收集,離心約20分鍾(2000-3000轉/分)。仔細收集清洗。如果保存過程中有沉澱形成,應再次離心。根據這一做法,以胸水、胸水和腦脊液(腦脊液)為參考。
     
      4、細胞培養上清
     
      檢測分泌成分時,用無菌管收集,離心20分鍾(每分鍾2000-3000轉),仔細收集。
     
      5、培養細胞
     
      檢測細胞內組分時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度約為100萬/ml。通過反複凍融或添加組織蛋白提取劑,細胞被破壞,細胞內成分釋放。離心20分鍾(2000-3000轉/分)。仔細收集清洗。如果保存過程中有沉澱形成,應再次離心。
     
      6、組織標本
     
      切完標本後,稱重。加入一定量的PBS,pH7.4。用液氮快速冷凍。試樣熔化後溫度保持在2-8℃。加入一定量的PBS(pH7.4)或組織蛋白提取劑,樣品用手或勻漿機均勻化。離心20分鍾左右(2000-3000 rpm)。仔細收集清洗。一份經過單獨加載後將進行測試,其餘的將被冷凍並存放。(內容僅供參考,如有問題或遇到問題請在線谘詢,名优馆ioses安装會竭誠為您服務)
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