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    小鼠白介素6 ELISA試劑盒的檢測原理和活化方法

    發布時間: 2020-08-12  點擊次數: 41次
      檢測原理:
      本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附檢測技術。特異性抗小鼠IL-6抗體預包被在高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本和生物素化的檢測抗體,經過孵育,樣本中存在的IL-6與固相抗體和檢測抗體結合。洗滌去除未結合的物質後,加入辣根過氧化物酶標記的鏈黴親和素(Streptavidin-HRP)。洗滌後,加入顯色底物TMB,避光顯色。顏色反應的深淺與樣本中IL-6的濃度成正比。加入終止液終止反應,在450 nm波長(參考波長570 - 630 nm)測定吸光度值。
      小鼠白介素6 ELISA試劑盒樣品活化方法:
      生物樣品中的通常以無活性的形式存在,在檢測指標活性前必須進行活化處理。
      活化方法如下:
      血清、血漿: 280 μL標準品&樣品稀釋液中加入40 μL樣品,混勻,加入40 μL活化試劑1,室溫孵育10分鍾。再加入40 μL活化試劑2,混勻後立即檢測。
      注意:樣品被稀釋了10倍!
      細胞培養上清:20 μL標準品&樣品稀釋液中加入100 μL樣品,混勻,加入40 μL活化試劑1,室溫孵育10分鍾。再加入40 μL活化試劑2,混勻後立即檢測。
      注意:樣品被稀釋了2倍!
      組織勻漿:1960 μL標準品&樣品稀釋液中加入40 μL樣品,混勻後檢測。
      注意:樣品被稀釋了50倍!
      試驗所需自備物品
      1. 酶標儀(450nm波長濾光片)
      2. 高精度移液器,EP管及一次性吸頭:0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
      3. 37℃恒溫箱,雙蒸水或去離子水
      4. 吸水紙
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